以日本Benifuji綠茶為原料,用50%乙腈提取茶葉有效成分,提取液經(jīng)氯仿脫咖啡堿和色素、乙酸乙酯和HP-20大孔樹脂富集兒茶素,得多酚含量高于80%的茶多酚粗品,再經(jīng)ToyopearHW-40S柱層析分離純化,得EGC、ECG、EGCG、EC及兩種未知成分。經(jīng)1H-NMR、MS和HPLC等分析,兩種未知成分為(-)-表沒食子兒茶素3-O(3-O-甲基)沒食子酸酯(EGCG3″Me)和(-)-3-O-甲基-表兒茶素沒食子酸酯(ECG3′Me)。采用TSKgelODS-100Z色譜柱和二極管陣列檢測器(DAD),建立了一種快速、靈敏分析茶葉中兒茶素和甲基化兒茶素的高效液相色譜法。色譜條件:TSKgelODS-100Z色譜柱,流動相為KH2PO4(pH2.5)-甲醇系統(tǒng),采用梯度洗脫,流速1.0mL/min,柱溫40℃,進(jìn)樣量20μL。結(jié)果表明,6種兒茶素在一定范圍內(nèi)線性良好,相關(guān)系數(shù)為0.9996~1.0000,平均加標(biāo)回收率在90.8%-105.9%之間,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于3.5%。
完成機(jī)構(gòu):南京農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院,南京210095