利用薄層層析方法對(duì)兒茶素合成途徑中的二氫黃酮醇還原酶/無(wú)色花青素還原酶促反應(yīng)產(chǎn)物兒茶素C進(jìn)行初步分離,用香草醛顯色法進(jìn)一步定量。以建立該酶促反應(yīng)產(chǎn)物的快速檢測(cè)方法。采用薄層層析方法,對(duì)薄層層析展開劑配方、及薄層分離產(chǎn)物均進(jìn)行了研究。該方法檢測(cè)波長(zhǎng)為500nm,展開劑最優(yōu)配方甲醇:乙酸乙酯:甲酸=8:8:1.5,層析分離所得顯色產(chǎn)物為兒茶素C。以兒茶素C為標(biāo)樣,線性范圍為50~500μg/ml,加標(biāo)回收率為91.0%~93.0%之間,RSD為3.39%。建立了薄層層析與香草醛比色法結(jié)合檢測(cè)兒茶素C含量的體系,該體系能夠快速測(cè)定茶葉中DFR/LAR酶反應(yīng)產(chǎn)物的含量。
完成機(jī)構(gòu):[1]安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)茶葉生物化學(xué)與生物技術(shù)教育部、農(nóng)業(yè)部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,安徽合肥230036 [2]安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,安徽合肥230036