目的將兒茶酚胺氧位甲基轉移酶基因（COMT）克隆到原核表達載體進(jìn)行可溶性表達，制備純化COMT蛋白，為深入研究COMT的功能提供材料。方法運用分子生物學(xué)方法構建融合表達質(zhì)粒Pet22b^＋ -COMT。將Pet22b^＋ -COMT轉入E．coli BL21（DE3）表達菌株，利用IPTG誘導表達，并用親和色譜純化COMT。結果經(jīng)測序分析成功構建了融合表達質(zhì)粒Pet22b^＋ -COMT。COMT基因在E．coli BL21（DE3）中表達相對分子質(zhì)量約為28000的蛋白質(zhì)，純化后，COMT蛋白的純度大于90％。結論COMT基因在原核中得到良好的表達，得到了純度較高的蛋白質(zhì)，為酶學(xué)活性研究奠定了基礎。
完成機構：中國醫學(xué)科學(xué)院中國協(xié)和醫科大學(xué)醫學(xué)生物學(xué)研究所,云南昆明650118
